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菌种传代操作规程
菌种传代操作规程
发布时间:2024-04-25 15:19:51 来源:
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G
M
P
管
理
编码:
文
件
页序
/
1/2
总页
题
目
菌种传代操作规程
制
定
制订日期
颁发部门
审
核
审核日期
质量部
批
准
批准日期
生效日期
分发部门
化验室
一、
目的:为使菌种传代操作规范化、制度化,故建立此规程
二、
适用范围:菌种传代须按本规程执行。
三、
责任者:微生物限度检查化验员,质量检测中心主任。
四、
正文:
1
、培养基的制备
按微生物限度检查用稀释剂、培养基配制操作规程及斜面配制操作规程配
制好相应培养基。大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽
孢杆菌、沙门菌、用胰酪大豆胨琼脂斜面培养基,白色念珠球菌、黑曲霉
用沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基,制备好的培养基预培养
48
小时后,确认
无菌落生长方可使用。
2.
菌种传代
2.1
菌种传代前应准备好适于该菌种生长的培养基和培养设备,所有操作
均应在符合生物安全保护的生物安全柜内进行。
2.2
点燃酒精灯,在火焰上部操作,将原有的菌种斜面(简称菌种管)与
待接种的新鲜斜面培养基
(简称接种管)
持在左手拇指、
食指及中指之间,
菌种管在前,接种管在后,使试管内斜面向上,两支试管口平齐,应斜持
试管呈
45
°角,
以免管底凝集水浸湿培养基表面。
用右手在火焰旁转动两
支试管胶塞,以便接种时易于拨取。再用右手持接种环的柄端,垂直或稍
斜地把接种环在火焰上灼烧。将接种环烧红约
30s
,随后将接种棒金属部
分在火焰上烧灼,以彻底灭菌。用右手的小指和手掌之间以及无名指与小
指之间,在火焰旁分别拔除两支试管的胶塞,持住。在将试管口在火焰上
通过以杀灭管口的细菌,但勿烧的过热,将烧灼的接种环插入菌种管内,
先接触无菌苔生长的培养
GMP
管理文件
题
页序
/
总页:
菌种传代操作规程
编码:
目
2/2
基上,
如有溶印则表明接种环未冷却,
待冷后,
再从斜面上挑取少许菌苔。
取出时接种环不能通过火焰,应在火焰旁迅速插入接种管,在斜面上由下
而上划
“
Z
”字型曲线,当接种完毕,立即将管口通过火焰灭菌,右手到
火焰旁塞上胶塞,不要将管口离开火焰旁去迎接右手的胶塞。最后将接种
环烧灼灭菌放置备用。
3.
培养
将以上接种好的各菌管放入相应温度的培养箱内,白色念珠菌放入
23-28
℃培养箱内培养
24-48h
,黑曲霉放入
23-28
℃培养箱内培养
5-7
天,
其它菌种放入
30-35
℃培养箱内培养
18-24
小时。
4.
保存
除铜绿假单胞菌需室温保存外,将其它传代培养后的菌种应放入
4-6
℃的
冰箱冷藏保存。
依据:
《中国药典》
2015
版及中国药品检验标准操作规范
本文来源:
https://www.2haoxitong.net/k/doc/0cab4cbfb94ae45c3b3567ec102de2bd9705dedc.html
《菌种传代操作规程.doc》
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