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饮用水中大肠杆菌检测方法是什么

发布时间：2024-04-19 22:50:24 来源：文档文库

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饮用水中大肠杆菌检测方法是什么大肠杆菌是比较常见的细菌，对于人体是有害的，常见于我们的饮用水当中，要是长时间的饮用含有大肠杆菌的水的话，对于身体的伤害是很大的。对此，要检查水中的大肠杆菌。那饮用水中大肠杆菌检测方法是什么?这个问题，很多的朋友都很好奇，下面就为大家简单的介绍一下。饮用水中大肠杆菌检测方法是什么?1、饮用水中大肠杆菌快速检测方法，其特征在于包括以下步骤：(1水样中微生物的收集及其DNA的提取：采用灭菌后的滤膜或滤器过滤水样，在装有无菌水的EP管中，洗涤滤膜，离心，弃上清液，备用;(2水样中微生物DNA的提取：A、向EP管中加入TE缓冲液，使之重悬;B、加入SDS和蛋白酶K，混匀，温育45min～1h;C、加入氯仿/异戊醇，混匀，离心，将上清液转入一个新EP管中;D、加入等体积的酚/氯仿/异戊醇，混匀，离心，将上清液转入一个新EP管中;E、加入异丙醇，轻轻混合直到DNA沉淀下来，离心;F、弃上清，沉淀物用乙醇洗涤，晾干;G、将沉淀重溶于TE缓冲液，摇匀;H、用紫外分光光度计测定提取的基因组DNA模板的0D值，计算其DNA浓度，计算方法为：DNA浓度(μg/μL=OD值260nm×样品稀释倍数×50/1000I、将基因组DNA模板做好标记，贮存，备用;(3PCR扩增;反应引物：上游引物：5’-tgttcagtggcaagagtt-3’下游引物：5’-taatcgatatacccgctc-3’50μL反应体系：10×PCR缓冲液5μLTag酶2U/μL1μLMgCl2(25mM5μLdNTP(2.5MM5μLddH2029μL上游引物10μM2μL上游引物10μ第1页
M2μL模板DNA1.5μg/μL1μL(4产物观察：A、凝胶的准备：先配置琼脂糖溶液，加热，使其充分溶解，再加入溴化乙锭溶液;B、配置TAE电泳液;C、倒胶：将配置好的琼脂糖溶液倒入胶板中，待其凝固后，放入电泳槽中;D、电泳：将扩增好的PCR产物与缓冲液按比例混合，加入到凝胶加样孔中，同时加入DNA分子量标准，接通电源，设定电压和电流，开始电泳。E、观察;将扩增产物在紫外光下观察，拍摄图片。上文就是关于饮用水中大肠杆菌检测方法是什么的介绍，现在大家了解了吧!其实可要我们不喝生水，饮用经过烧开的水，就没有这些问题了。这就是为什么总是提倡大家和凉开水的原因。而且多喝凉开水对身体是很有好处的，无论是男女老少。第2页

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