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发布时间:2024-04-20 00:05:10 来源:文档文库
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水中大肠杆菌群检测方法-多管发酵法NIEAE201.54B一、方法概要本方法系用以检测水中革兰氏染色阴性,不产生内生孢子之杆状好氧或兼性厌氧菌,且能在35±1℃、48±3小时发酵乳糖并产生酸及气体之大肠杆菌群(Coliformgroup);在不同体积或不同稀释度之水样所产生之结果,以「100mL水中最大可能数(MPN/100mL)」表示100mL水中存在之大肠杆菌群数目。二、适用范围本方法适用地面水体、地下水体、废水、污水及水源水质水样中大肠杆菌群之检验。三、干扰(一水样中含有抑制或促进大肠杆菌群细菌生长之物质。(二检测使用的玻璃器皿及设备含有抑制或促进大肠杆菌群细菌生长的物质。四、设备(一量筒:100至1000mL之量筒。(二吸管:有0.1刻度之10mL灭菌玻璃吸管或市售无菌塑料吸管,或无菌微量吸管(micropipet)。(三试管:大小约150×15mm之试管或有盖螺旋试管。(四发酵管(fermentationtube):大小约22×9mm之玻璃管。(五稀释瓶:容量约100mL可灭菌之硼硅玻璃制品。(六锥形瓶:200至2000mL之可灭菌硼硅玻璃制品。(七采样容器:容量120mL以上无菌之硼硅玻璃瓶或无菌塑料有盖容器,或市售无菌袋。(八冰箱:温度能保持在4±2℃者。(九天平:待测物重量大于2g时,须能精秤至0.01g;待测物重量不大于2g时,须能精秤至0.001g。(十培养箱:温度能保持在35±1℃者。(十一高压灭菌釜:温度能维持在121℃(压力约15lb/in或1.1Kg/cm)灭菌15分钟以上者。(十二高温干热烘箱:如用于玻璃器皿等用具之灭菌,温度须能保持在160℃达2小时或170℃达1小时以上者。22
(十三接种环:为白金或镍铬合金制,适用于细菌接种或移植,亦可使用无菌塑料制品。(十四pH计:精确度达0.1pH单位。五、试剂(一试剂水:蒸馏水或去离子水,导电度在25℃时小于2μmho/cm(μS/cm)。(二培养基,应使用市售商品化培养基。1、硫酸月桂酸胰化蛋白胨培养基(Laurylsulfatetryptosebroth,简称LST)1倍浓度LST培养基含有下列成份:胰化蛋白胨(Tryptose)乳糖(Lactose)氯化钠(NaCl)5.0g磷酸氢二钾(K2HPO4)2.75g磷酸二氢钾(KH2PO